細胞計數儀的操作流程，你了解多少？

　　細胞計數儀的操作流程，你了解多少？

　　細胞計數是細胞培養研究中的一項基本研究，它是了解培養細胞生長狀態，測定培養基、血清和藥物等物質生物作用的重要手段。細胞計數儀能夠在1min以內對培養的細胞分析，并獲得細胞活細胞和死細胞濃度、細胞平均體積大小、生存能力、細胞大小或體積分布曲線圖。細胞計數器還有用于藻類，微生物等直徑細胞計數器范圍內的生物。相對血球計數板法，細胞計數儀計數更加精確，快速便捷，誤差更小。

　　細胞計數儀的操作流程：

　　1、用上述胰蛋白酶/EDTA使貼壁和半貼壁細胞懸浮，并將其重懸于至少相當于胰蛋白酶體積的一定體積的新鮮培養基中。對于成團生長的細胞，離心后在小體積中重懸，輕輕移液以吸碎成團。

　　2、在無菌條件下，移取100-200μL細胞懸液。

　　3、加入等體積的臺盼藍（稀釋倍數=2），輕輕移液混勻。

　　4、清潔血細胞計數器。

　　5、用水或哈氣濕潤蓋玻片。輕壓蓋玻片，使其在腔室內來回滑動，直到出現牛頓折射環（牛頓折射環在蓋玻片下視為彩虹狀環）。

　　6、用細胞懸液（約5-10μl）填充腔室兩側，用x20放大倍數在倒置相差顯微鏡下進行觀察。

　　7、計數活細胞（亮細胞）和非活細胞（染成藍色）的數量。理想情況下應計數>100個細胞，以提高細胞計數的準確性。請注意獲得>100細胞計數的方格數。

　　8、使用下面的公式計算活細胞和非活細胞的濃度以及活細胞的百分比。